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余甘子叶的研究概况

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中国民族民间医药2018年2月第27卷第4期Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy,2018,VoL27,No.4 余甘子叶的研究概况 王捷 叶勇 梁浩 蒋俊俊 王羽中 石小燕 韦嘉佳 韦锦斌 陈 勇 刘丽敏h 南宁530021;2.广西医科大学,广西艾滋病防治研究重点实验室,广西南宁530021; 3.广西中医药科学实验中心,广西南宁530200 1.广西医科大学制药厂,广西【摘要】 文章在实验研究基础之上,对余甘子叶主要活性成分、药理作用、临床应用、质量控制、专利等进行综 述,以期为深入研究开发利用余甘子叶提供参考依据。 【关键词】 余甘子叶;主要活性成分;药理作用;临床应用;质量控制 【中图分类号】R29 【文献标志码】A 【文章编号】1007—8517(2018)04-0040—05 0verview on[.e,aves of Phyllanthus emblica L· WANG Jie YE Yong LIANG Hao JIANG Junjun WANG Yuzhong SHI Xiaoyan WEI Jiajia WEI Jinbin。CHEN Yong3 LIU Limin 1.Phamaceutical Factory of Guangxi Medical University,Nanning 530021,China; 2.Guangxi Medical University,Key Laboratory of AIDS prevention and control research in Guangxi,Nanning 530021,China; 3.Guangxi Scientiifc Research Center of Traditional Chinese Medicine,Nanning 530200,China Abstract:On the basis of experimental research,to overview the main active ingre—dients,pharmacological action,clinical ap- plication,quality control,patents and SO on.For the development and utilization of indepth study of Phyllanthus emblica L.,to pro— vide favorable basis. Key words:Leaves of PhyUanthus emblica L.;The Main Active Ingred—ients;Pharmacological Action;Clinical Application; Quality Control 余甘子( y2lunthus emblaca L.)是大戟科 (Euphorbiaceae)叶下珠属(Phyllunthus)植物, 又名余甘树、油甘子、庵摩勒、橄榄、滇橄榄、 园酸角、油柑、望果、牛甘子、久如拉(藏语)、 含维生素C,生津止渴,润肺化痰,治咳嗽、喉 痛,解河豚鱼中毒等,初食味酸涩,良久乃甘, 种子、根、茎、叶、花亦可人药,叶晒干供枕芯 用料,种子油供制植物肥皂。余甘子始载于公元 麻项邦(傣语)等,生于海拔200~2300 In山地 疏林、灌丛、荒地或山沟向阳处 j,喜温暖干热 气候,分布在南亚热带、热带地区,包括中国福 建、、广东、海南、广西、四川、贵州、云 南等地,还有印度、斯里兰卡、中南半岛、印度 尼西亚、马来西亚和菲律宾等,美国、古巴、波 多黎各、特立尼达、巴拿马、肯尼亚、南非等有 引种栽培 J。其树高达23m,树姿优美,可作庭园 304年晋代《南方草木状》,原译名庵摩勒,常用 清热解毒药,中国药典2015版收载,广西壮药质 量标准第一卷收载,藏药标准、云南省药品标准 收载_3I4 J。近年随国内余甘子种植业规模化发展, 余甘子叶引起学界和产业界关注和思考。本文在 实验研究基础上,对检索数据库(中国生物医学 文献数据库、重庆维普数据库、清华同方数据库、 万方数据库)、检索时间范围(2007年1月1日~ 2017年l2月)等所得相关文献统计分析总结后, 对余甘子叶、主要成分、药理作用、临床应用、 风景树和果树,其木材棕红褐色,坚硬,结构细 致,有弹性,耐水湿,供农具家具用材。果实富 基金项目:南宁市青秀区科学研究与技术开发计划项目科技惠民专项(编号:2016FA01);南宁市青秀区科学研究与 技术开发计划项目重大专项(编号:20157_/)1);广西艾滋病防治研究重点实验室(gklapt201504)。 作者简介:王捷(1969一),男,汉族,硕士研究生,高级工程师,硕士生导师,研究方向为新药研究、健康促进、 医药教育、产业经济等。E—mail:2218250952@qq.OO/11 通信作者:刘丽敏(1977一),女,汉族,博士研究生,副教授,硕士生导生,研究方向为中药药理学。E—mail:li— uliminl26@1 63.com 中国民族民间医药2018年2月第27卷第4期Chinese Journal of Ethnomedieine and Ethnopharmacy,2018,Vo1.27,N0.4 质量控制以及专利等进行综述,以期为深入研究 开发利用余甘子叶提供参考依据。 1主要活性成分 烷和水2种提取物能50%抑制PMN游走。余甘子 叶不同溶媒提取物中极性化合物所占百分含量越 高,对PMN游走抑制作用越强。己烷、甲醇、四 氢呋喃、1,4一二嘌烷、甲苯和氯仿等7种溶媒提 取物能抑制20%一35%N一甲酰一L一甲二磺酰一 L一亮氨酰一L一苯丙氨酸介导的白细胞脱颗粒。 余甘子叶含酚类、有机酸、还原糖、多糖、 黄酮类、三萜等活性成分 一 ]。在研究余甘子叶脂 溶性部位时,用一定浓度乙醇溶液渗滤提取后, 以系统溶剂分离法进行部位分离,利用聚酞胺柱 层析及制备型HPLC法对其石油醚、乙酸乙酯、正 丁醇部位分离纯化得l1个化合物,经鉴定为:B 余甘子叶所含槲皮素可对抗急性痛风性关节炎, 对抗衰老机体神经炎,所含没食子酸、槲皮素、 山奈酚和其它多酚物质能清除DPPH自由基,抗氧 化作用显著。 一谷甾醇(p—Sitosterol,I)、p一胡萝卜苷(B —Carotene,II)、蔚蓄苷(Avicularin,1I)、山奈 酚(Kaemferol,1V)、槲皮素(Quercetin,V)、 山奈酚一7一甲醚(kaempferol一7一methylether, Ⅵ)、鞣花酸(ellagic acid,VII)、没食子酸(ga1. 1ic acid,Ⅷ)、没食子酸乙酯(ethyl gallate,IX)、 正三十四烷酸(tetratriacontanoic acid,X)和正三 十烷醇(1一Triacontanol,XI)。采用气相色谱一 质谱联用(GC—MS)分析广西余甘子叶挥发油成 分,分离29个色谱峰,鉴定2,6二甲基萘、水杨 酸甲酯、a一紫罗兰酮、香叶基丙酮、金合欢基丙 酮、叶绿醇、芥酞胺、油酰胺、异植物醇、二叔 丁基苯酚等26种成分,占已分离组分总含量的 90%以上,其中叶绿醇、二叔丁基苯酚、异植物醇 为相对含量较高成分 J。 2药理作用 2.1镇痛抗炎和抗氧化作用有研究者 。。 采用 二甲苯致小鼠耳肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管 通透性、棉球诱导小鼠肉芽组织增生试验模型, 通过胸腔白细胞游走试验,应用交叉菜胶致足肿 胀试验,测定炎性组织中前列腺素E:(PGE:)含 量,采用改良寇氏法测定其LD 。等,结果显示余 甘子叶提取物明显延长小鼠舔后足时间,减少扭 体次数,降低甲醛测痛试验第一、二时相疼痛强 度;减轻小鼠耳肿胀,抑制毛细血管通透性增高 及肉芽组织增生,有效抑制白细胞游走,明显减 少大鼠炎症组织中PGE2含量,其LD50为10.570g/ kg,95%可信限为10.52—10.62g/kg,余甘子叶 提取物镇痛、抗炎作用显著,其机理可能与抑制 PGE 产生与释放有关。另外,国内有用10种溶媒 分别提取余甘子叶,体外研究其对人多形核白细 胞(PMN)功能的抑制活性,甲醇、四氢呋喃和 1.4一二嗯烷3种提取物能90%抑制白三烯B (LTB )诱导的PMN游走,呈剂量相关;二氯甲 2.2保护肺功能余甘子叶提取物可对抗耐药细 菌性肺部感染。钟振国等_1 建立慢性支气管炎并 肺气肿大鼠模型,采用病理组织切片及血气分析 方法观察余甘子叶提取物对支气管炎及肺气肿病 理及血氧含量影响,结果显示余甘子叶提取物对 由慢性支气管炎并肺气肿大鼠的支气管炎症及肺 泡病理损害有明显保护作用,减少支气管壁炎症 细胞浸润及肺大泡形成,提高动脉血氧含量,各 项指标均优于模型对照组及阳性药物组,接近于 正常对照组,有保护肺功能¨ 埽J。 2.3保肝作用在余甘子叶没食子酸诱导人肝癌 细胞株BEL一7404产生凋亡机制研究实验中,采 用PI和Hoechst33342双染色法流式检测对人肝癌 细胞株BEL一7404各周期的影响,细胞荧光免疫 染色法和Western blot法检测Bax和Bcl一2蛋白表 达的变化,结果显示余甘子叶化学成分没食子酸 作用BEL一7404细胞72h后,G2/M期细胞数增 多,呈现细胞阻滞现象,并伴有大量的细胞凋亡; 药物作用人肝癌细胞株BEL一7404 72h后Bax蛋白 表达升高,Bcl一2蛋白表达则降低,余甘子叶化 学成分没食子酸能阻滞G2/M期细胞,通过上调 Bax和下调Bcl一2蛋自表达,致线粒体膜电位下 降,激活Caspase,导致细胞死亡,可能是其诱导 人肝癌细胞株BEL一7404凋亡的分子机制之一。 余甘子叶所含没食子酸诱导人肝癌细胞SMMC一 7721凋亡,抗实验性肝纤维化,所含槲皮素抗Co— nA诱导自身免疫性肝损伤等_1 。 2.4影响免疫 在探讨余甘子叶提取物(PLFs) 对正常小鼠免疫功能影响实验中,余甘子叶提取 物的LD 。为9.91 lg/kg,余甘子叶提取物显著升高 小鼠碳廓清能力、吞噬指数和NK细胞活力,促进 正常小鼠非特异性兔疫功能,安全性较高。机体 抗肿瘤免疫机制包括细胞免疫和体液免疫两方面, 相互协作共同杀伤肿瘤细胞,对免疫原性弱肿瘤, 非特异性免疫应答有更重要意义 。 中国民族民间医药2018年2月第27卷第4期Chinese Journal of Ethnomedieine and Ethnopharmacy,2018,Vo1.27,No.4 2.5抗恶性肿瘤 实验研究余甘子叶提取物在体 外抗肿瘤作用,采用渗漉法及加热回流法从余甘 子叶提取分离到G1、G2、A、B、C、D、E、bb、 cc、dd、ee等11个部位,采用MTr法、集落形成 法观察。MTI'法是筛选抗肿瘤活性成分行之有效 简便快速方法,是美国国立肿瘤研究中心所采用 抗癌药物筛选方法,集落形成法及集落抑制率常 用于抗癌药物敏感试验、肿瘤放射生物学试验。 结果显示余甘子叶的1 1种提取物对白血病细胞株 L1210和P388DL,宫颈癌细胞株Hela,胃癌细胞 株SGC7901,黑色素瘤细胞株B16,神经性肿瘤细 胞株NU108—15,肝癌细胞株Bele7404等7种肿 瘤细胞株的增殖均有不同程度的抑制作用,其中 cc部位,即黄酮类成分作用最强,余甘子叶提取 物具有体外抗肿瘤活性。另外,建立荷瘤小鼠模 型,观察余甘子叶提取物对荷瘤小鼠外周血T淋 巴细胞CD¨,CD¨亚群的影响,结果显示余甘子 叶提取物显著提高荷瘤小鼠T淋巴细胞及其CD 亚群相对数量,上调CD /CD¨亚群比例,通过 提高T淋巴细胞及其CD 亚群相对数量,使 CD /CD¨比例接近正常值,可能是余甘子叶提取 物抗肿瘤的免疫学机制之一。另外实验证实余甘 子叶所含没食子酸能抑制人神经母细胞瘤增殖, 抗胃癌细胞MGC一803;所含槲皮素抑制肺癌肿瘤 细胞的生长和转移,对胶质瘤U87细胞侵袭、迁 移、增殖 。 2.5抗菌和抗病毒作用 用体外细菌培养方法研 究余甘子叶提取物抗菌作用,采用琼脂稀释法测 定,结果显示余甘子叶提取物在体外对肺炎克雷 伯杆菌、金黄色葡萄球菌敏感株、金黄色葡萄球 菌耐药株、大肠杆菌、伤寒沙门菌、白色念珠菌 等均有不同程度的抑制作用。余甘子叶所含多酚 类可抑制人消化道常见菌 j。 3临床应用 3.1 民族药应用传统中医药认为,余甘子叶清 热解毒,利湿消肿,民族药临床应用有不同,民 间常用于口疮、疔疮、湿疹、皮炎、水肿、高血 压、毒蛇咬伤、跌打损伤等 。 3.2治疗1型和2型糖尿病以及并发症 临床运 用余甘子叶提取物治疗糖尿病的效果明显,其作 用机制包括显著提高人白细胞干扰素(IFN一0【) 含量,改善患者体内免疫功能紊乱;增加心肌糖 原水平,调节脂肪能量供应比例、升高糖原储备 量、节省糖原的消耗等多方面低血糖,减少 持续低血糖危害;保护B细胞及活性,抵抗胰岛 素分泌减少,维护生物膜稳定,保护胰腺组织等, 对1型糖尿病治疗发挥积极作用。同时其通过增强 骨骼肌GLUT4mRNA表达而增加GLUT4生物合成, 加速葡萄糖跨膜转运及外周组织利用葡萄糖,改 善胰岛素抵抗,增加胰岛素敏感性;显著抑制组 胺所致的毛细血管通透性增强和白细胞游出,减 少高浓度的TNF—o【、IL一1和NO造成的病理损害 而改善糖尿病及其并发症中慢性炎症引起不同的 病理刺激和组织损坏;消除自由基,改善氧化应 激引起的活性氧(ROS)和活性氮(RNS)的产 生与机体内抗氧化防御系统的清除之间失衡所造 成的致胰岛B细胞功能损伤及外周胰岛素抵抗, 对于治疗2型糖尿病也发挥积极作用。另外,其缓 解糖尿病神经病变及疼痛;有效降低总胆固醇 (TC),低密度脂蛋白(LDL),甘油三酯(TG) 和极低密度脂蛋白(VLDL),增加患者的高密度 脂蛋白(HDL),抵抗糖尿病心血管病变;降低红 细胞、晶状体和坐骨神经中山梨醇累积,使患者 视网膜微血管瘤及血斑消退;抑制肾脏醛糖还原 酶mRNA的表达而保护肾脏等,控制糖尿病引起 的神经病变、心血管病、视网膜病、肾病等以及 几乎涉及全身组织和器官损害 。 3.3抗艾滋病有研究利用余甘子叶开展余甘子 药物组合物及其制备方法、制剂和抗艾应用研究, 传承传统中医药理论,通过清热解毒(抗毒抗 菌)、扶正祛邪(增免)相结合原则治疗艾滋病, 在治疗艾滋病引起的皮肤病黏膜病变,如:反复 口腔黏膜溃疡、单纯疱疹性口炎、脂溢性皮炎、 全身皮疹瘙痒、湿疹、带状疱疹、痤疮,多种感 染混合存在等,取得明显疗效,减少机会性感染, 明显改善患者饮食睡眠及生活质量_3 。 3.4治疗皮肤病运用配伍余甘子和余甘子叶提 取物或成分的软膏治疗湿疹、慢性湿疹、皮炎湿 疹、神经性皮炎、外耳道湿疹等的临床观察,疗 效明显,且复发率低,无严重不良反应 -39]。 3.5其它利用余甘子叶及其制剂可应用于治疗 慢性支气管炎并肺气肿、肝病、感染、免疫低下 症、心脑血管病、恶性肿瘤等 j。 4质量控制 4.1鉴别方法 利用薄层色谱法和对照物质,可 鉴别余甘子叶。余甘子叶提取液在紫外一可见光 区都有吸收峰,石油醚、乙酸乙酷、乙醇提取液 特征吸收峰较多、较强;不同提取溶剂冷浸液、 中国民族民间医药2018年2月第27卷第4期Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy,2018,Vo1.27,No.4 ·43· 回流液特征吸收峰峰位相同,其导数光谱是吸收 度或光强度对波长变化的曲线,解决相邻吸收带 重叠、峰位移动、峰形不对称、肩峰等现象,使 谱带宽度变小,分辨率增高,有一定的鉴别意义。 建立余甘子叶指纹图谱鉴别方法,采用高效液相 色谱法测定,乙腈一0.1%磷酸溶液梯度洗脱,流 速1.0 mL/min,柱温25℃,紫外检测波长218 nm,结果:余甘子叶中有15个共有峰被确定为指 纹峰,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统 A版》计算机软件评价l0批余甘子叶指纹图谱相 似性,其结果均>0.9,方法简便可靠,可用于余 甘子叶鉴别和质量控制 。 4.2含量测定 以榭皮素为对照品,利用紫外可 见分光光度法测定余甘子叶提取物中总黄酮含量, 测得其总黄酮平均含量51.60%,可作为测定余甘 子叶提取物中总黄酮含量方法。另有采用HPLC法 检测余甘子叶中槲皮素和山奈酚含量,色谱柱为 Thern1o HypersilBDSCI8(4.6mm×250mm,5vm), 流动相乙睛一1%磷酸,流速为1.0 mL/min,柱温 为3O℃,检测波长360~370 am,结果显示不同产 地余甘子叶,均检出没食子酸,但含量有差异, 相差近10倍,槲皮素含量0.12%一0.68%和山奈 酚含量0.033%~0.12%。另有采用HPLC法检测 余甘子叶中没食子酸含量,迪马c 。色谱柱,流动 相甲醇一0.2%磷酸(3:97),流速1.0 mL/min, 检测波长269 nm,室温,结果:不同产地余甘子 叶没食子酸含量差异大,没食子酸含量0.022— 0.498 mg/g。HPLC法可用于广西余甘子叶的定性 定量检测方法 。 5 专利 主要有利用余甘子叶配伍其它中药民族药制 成保健茶、抗艾滋药物 、抗癌中药等申请国内 专利保护。 6结语 余甘子是一种极富特色的天然植物资源,药 食同源 ],价廉物美,保健和医药价值明确可靠, 食用药用历史悠久。余甘子叶为没食子酸、槲皮 素、山奈酚等生物活性成分的天然来源药库,对 抗心脑血管病、恶性肿瘤等作用明确,药性平和, 药食同源程度较高,在已有成果基础上,仍需加 强余甘子叶多方面的研究和利用。 参考文献 [1]刘延泽,李海霞,许利嘉,等.药食兼用余甘子的现 代研究概述及应用前景分析[J].中草药,2013,44 (12):1700—1706. 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