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铬矾明胶在脑组织制片中的粘合剂作用

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维普资讯 http://www.cqvip.com 第24卷第6期 2002年6月 第二车医大学学报 Vo1.24.No.6 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MIU叮ARIS TERTIAE Jun.2002 745 章编 :1000—5404(2002)06.0745—0 技术方法 铬矾明胶在脑组织制片中的粘合剂作用 Adhesive effect of chrome alum gelation in the prepartion of cerebral tissue section 王亚丽,徐 飞,汤金梁,叶明福 提要:¨的(第三军医大学附属新桥医院病理科,重庆400037) 用铬矾明胶、APES、多聚赖氨酸及乳白胶四 选择良好的组织粘合剂,解决冷冻脑组织切片易脱片问题。方法种粘合剂分别标贴冷冻脑组织切片各300张,经常规制片处理,计数脱片数与脱片率。结果铬矾明胶脱片率仅为I%,而乳白胶 为8.67%、APES为6.67%,多聚赖氨酸为5.67%..结论铬矾明胶对脑组织粘合作用强,防脱片效果好,操作简便,经济实用,值得 推广 我们在实际工作中经常遇到一般的粘合剂用于脑 组织切片粘合时粘合性较差,脱片较严重,尤其是应用 10~30 tn1的厚片脑组织冷冻切片作免疫组化或原位 i分子杂交技术时,脑组织脱片更为明显。为解决组织 粘合剂在脑组织制片染色中的粘片作用,我们选用4 种不同的粘合剂进行比较观察,结果显示铬矾明胶对 脑组织的粘片效果良好,脱片率低,现总结报告如下。 1材料和方法 选用APES、多聚赖氨酸、乳白胶及铬矾明胶共4种粘合剂 用新鲜脑组织冷冻切片,每种各标片300张,常规制片处理分 别计数脱片数量和脱片率。 铬矾明胶的配制及其使用方法:用1 g明胶,0.05 g铬矾, 放入100 nd蒸馏水中,摇匀后放入水浴锅内加温至6O~70℃ 8.67%,是4种粘合剂中脱片率最高者;其次是APES, 其脱片率为6.67%;多聚赖氨酸粘合剂标贴脑组织虽 脱片较少,但其脱片率仍为5.67%。由此可见铬矾明 胶作为脑组织冷冻切片的粘合剂,其效果明显优于其 它粘合剂的作用。此外,在用铬矾明胶作为脑组织冷 冻切片粘合剂时,还必须对载玻片经过严格的清洗,保 持玻片干净。对配制好的铬矾明胶粘合剂也不易放置 时间过长,一般不宜超过一月,以免影响效果。 用于病理组织切片的粘合剂有多种类型~ ,如多 聚赖氨酸、乳白胶、APES、蛋白甘油等。在实际工作 中,应用这几种粘合剂在非脑组织切片中的粘片效果 良好,但在脑组织冷冻切片的制片过程中这几种粘合 剂均发生数量不等的脱片。为此,我们选用铬矾明胶 对300张脑组织冷冻切片进行标片染色,并于其它3 种粘合剂标片效果进行比较分析,发现铬矾明胶脱片 少,脱片率仅占1%。说明铬矾明胶对脑组织的粘合 作用强,是冷冻脑组织切片良好的粘合剂之一。 铬矾又名硫酸铬钾,是能溶于水而不溶于醇的结 晶体,明胶是高分子水溶性蛋白质类物,当二者互相混 杂络合形成的胶状混合物涂于玻片上再与富含水份与 脂类的脑组织粘贴在一起,可能产生更牢固的粘合作 用 一。此外,铬矾明胶价格低廉,用量也小,配制方法 较简单,且对免疫组化染色和原位分子杂交技术的结 果无任何影响,背景清晰,为脑组织常规制片、冷冻切 待铬矾明胶溶解冷却后,用滤纸和漏斗过滤。使用时将铬矾明 胶粘合剂涂滴30~40”l在玻片上,然后用另一张干净玻片轻 轻把粘合剂压拉均匀,室温下待玻片自然干燥,4℃冰箱内保 存备用 2结果 表1 表1 4种粘合剂对于组织冷冻切片脱片的结果比较分析 片和科研带来了巨大方便,值得推广使用。 关键词:脑组织冷冻切片;铬矾明胶;粘合剂 中图法分类号:R322—34 文献标识码:B 3讨论 参考文献: f1]徐飞,王亚丽乳白胶作为粘片剂的应用[J].诊断病理杂志, 雄,邓平非.多聚甲醛在免疫组织化学染色防脱片中 1999,6(4):264. 从上表中的4种粘合剂各标贴300张脑组织冷冻 切片的脱片数统计结果显示:铬矾明胶在300张切片 中仅脱片3张,脱片率仅占1%;乳白胶脱片率为 作者简介:I・、I (1974一),殳,河南省灵 市人,技师,主要从事病理技术方 面的研究电活:(023)68755114—74697 收稿日期:2001—02—13;修回日期:2001—06—10 [2]贺占国,胡的应用[J].诊断病理学杂志,1997,1(1):46. 『3]中国医药公司上海化学试剂采购供应站编.试剂手册 M .第2版. 上海:上海科学技术出版社1985.322. (编辑谢义霞) 

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