山东医药2011年第51卷第44期 能紊乱,尤其是交感神经活性增强时,影响心电稳定 损害及心血管事件的发生具有重要意义。 参考文献: [1]Sega R,Trocino G,Lanzarotti A,et a1.Alterations of cardiac struc— ture in patients with isolated office,ambulatory,or home hyperten・ 性、降低室颤阈值而增加猝死风险的预测价值方面, HRV被认为是较早应用于临床,且能较好反映评估 心血管危险水平的一项重要的无创性指标_6 J。目 前其在心肌梗死后死亡危险的预测及早期糖尿病神 经病变的判断作用肯定。高血压患者多同时伴有自 主神经功能紊乱,即交感神经兴奋性增加,副交感神 经张力降低,这是高血压患者发生恶性心血管事件 的先兆和预测心源性死亡的危险因素。 sion:Data from the general population(Pressione Arteriose Monitor- ate E Loro Associazioni[PAMELA]Study)[J].Circulation, 2001,104(12):1385—1392. [2]Fagard RH,Comelissen VA.Incidence of cardiovascular events in white—coat,masked and sustained hypertension versus true normo- tension:ameta-analysis[J].J Hypertens,2007,25(11):2193— 2198. 本研究采用的时域指标中SDNN、SDANN、 SDNN.Index、r.MSSD反映交感神经活性 j。本文观 察到和正常血压者相比,MH患者的SDNN、 SDANN、SDNN.Index、r.MSSD明显下降,且与EH患 者相比无统计学差异,提示MH与EH一样存在自 [3]Stergiou GS,Salgami GV,Tzamouranis DG,et a1.Masked hyper- tension assessed by ambulatory blood pressure veI ̄US home blood pressure monitoring:is it the same phenomenon[J].Am J Hyper- tens,2005,18(6):772-778. [4]Mancia G,Facchetti R,Bombelli M,et a1.Long—term risk of mot- tliaty associated with selective and combined elevation in ofice,f 主神经功能紊乱,即交感神经活性增强和迷走神经 活性下降。MH患者HRV下降可能与EH患者交感 神经系统和肾素血管紧张素系统活力增强,以及压 力感受器敏感性降低有关。 home and ambultaory blood pressure[J].Hypertension,2006,47 (5):846-853. [5]Bombelli M,Sega R,Facchetif R,et a1.Prevalence and clinical signiicance off a greater ambulatory versus office Mood pressure MH患者HRV下降可能是预测心血管事件的 危险因素,其参与EH的始动机制,且与EH的 靶器官损害密切相关,并且可能是进展为持续性高 血压的主要原因之一,这对重视MH的临床预后有 一(‘reversed white coat’condition)in a general population[J].J Hypertens,2005,23(3):513-520. [6]Kudaiberdieva G,G ̄renek B,Timurlp aB.Heart rate variability as a predictor of sudden cardiac death[J].Anaddu Kardiyd Derg, 2007,7 suppl 1:68-70. 定的指导意义。因此,加强对MH患者的监测,重 [7]郭继鸿,张萍.动态心电图学[M].北京:人民卫生出版社,2003: 196-224. 视其动态血压水平,并尽可能使血压控制在理想水 平,预防及延缓动脉硬化的发生发展,对减少靶器官 (收稿日期:2011-02-21) Cx43和Fas在胃癌组织中的表达 罗海清,官成浓,余忠华,王镇南,梁亚海 (广东医学院附属医院,广东湛江524001) 摘要:目的研究问隙连接蛋白43(Cx43)和凋亡调节因子Fas在胃癌组织中的表达情况。方法应用免疫组 化法检测70例胃癌患者手术切除的癌组织和癌旁正常组织中Cx43和Fas表达水平。结果Cx43在胃癌组织中 的表达率为44.29%(31/70),在癌旁正常组织中的表达率为92.86%(65/70),P<0.叭;Fas在胃癌组织中的表达 率为40.00%(28/70),在癌旁正常组织中表达率为87.14%(61/70),P<0.01。Cx43表达水平与胃癌组织学分化 程度、浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05),Fas表达水平与胃癌组织学分化程度、浸润深度、TMN分期、淋巴结转 移有关(P<0.05)。结论中图分类号:R735.2 胃癌组织中Cx43和Fas表达水平的检测有助于判断胃癌的恶性程度。 文献标志码:B 文章编号:1002-266X(2011)44-0083-03 关键词:间隙连接蛋白43;Fas;胃肿瘤;免疫组织化学 胃癌的形成和转移是多因子、多基因共同作用 隙连接蛋白43(Cx43)表达的下降 。Fas是重要 的细胞凋亡调节因子,能在一定程度上反映肿瘤的 83 的结果。有研究显示,多种人类癌细胞都有细胞间 生物学行为 J。我们采用免疫组化方法检测Cx43 和Fas在胃癌中的表达情况,探讨两者与胃癌生物 学行为的关系。 1材料与方法 1.1材料收集我院2006年1月一2010年12月 病理科归档的病历资料完整的7O例胃癌组织标本, 按全国胃癌协作组病理规范进行病理诊断和分级。 在研究中,将肿瘤分成两个组织学亚型:分化型癌包 括乳头状腺癌和管状腺癌,未分化癌包括低分化腺 癌、黏液细胞癌和印戒细胞癌。所有患者术前未行 化疗或放疗,同时另取距离癌组织边缘5 cm非肿瘤 的正常组织石蜡标本为对照。 1.2主要试剂和方法兔抗人Cx43多克隆抗体和 鼠抗人Fas单克隆抗体购自北京中杉金桥生物有限 公司,稀释浓度为1:50。即用型免疫组化试剂盒购 自天津灏洋生物制品有限公司。采用免疫组化SP 法,DAB显色,具体操作按说明书进行。用PBS代 替一抗作为阴性对照,采用生物公司提供的阳性切 片为阳性对照。 1.3阳性结果判定Cx43和Fas分别以胞核和胞 质中出现棕色或棕黄色颗粒为阳性细胞。按半定量 积分法判断两者表达情况,根据染色强度及阳性细 胞所占比例分别记为0~3分。染色强度:未着色为 0分,着色浅为1分,中度着色为2分,着色深为3 分。阳性细胞百分率:高倍镜(×400)下随机选取 10个视野,每个视野计数100个细胞。计算其平均 阳性百分率。根据平均阳性细胞百分率分为:阳性 细胞数≤5%为0分,6%一25%为1分,26%一49% 为2分,/>50%为3分。两项评分相加,0~1分为 (一),2分为(+),3—4分为(++),5—6分为(+ ++),(+)一(+++)均表示为阳性。 1.4统计学方法采用SPSS13.0统计软件,各组 问差异比较用 检验,以尸≤0.05为差异有统计学 意义。 2结果 2.1 Cx43和Fas的表达情况Cx43在胃癌组织中 的阳性表达率为44.29%(31/70),在癌旁正常组织 中的阳性表达率为92.86%(65/70) =38.314 4, P<0.01;Fas在胃癌组织中的阳性表达率为 40.o0%(28/70),在癌旁正常组织中的阳性表达率 为87.14%(61/70) =33.588 9,P<0.01。 2.2 Cx43、Fas在胃癌组织中的表达与临床病理因 素的关系见表l。 3讨论 细胞间隙连接通讯在细胞的新陈代谢、内环境 84 山东医药2011年第5l卷第44期 表1 Cx43、Fas蛋白表达水平与胃癌 临床病理因素的关系[例(%)] 稳定、增殖和分化等生理过程中发挥着关键的调节 作用。间隙连接主要通过缝隙连接蛋白发挥作用。 Cx43表达减少或缺失与多种肿瘤的发生、发展及转 移密切相关_4 J。Miekus等 报道,前列腺上皮表达 Cx43蛋白,而进展期分化差的癌细胞Cx43表达明 显降低。Pu等 研究发现Cx43表达水平与星形胶 质细胞瘤的恶性程度和肿瘤增殖活性呈负相关,认 为Cx43在胶质细胞瘤的恶性发展中起关键作用。 本研究表明Cx43在胃癌肿瘤组织中的表达率低于 正常组织,且与胃癌组织学分化程度、浸润深度、淋 巴结转移有关。 凋亡异常与肿瘤的发生及神经系统退行性病变 有重要关系。Fas是近年发现的细胞凋亡信号受 体,当与其特异性配体结合后,可以传导凋亡信号, 诱导所在细胞的凋亡 。Das等 观察Fas在29 例宫颈癌和3种宫颈癌细胞系中的表达,发现Fas 表达明显下调。Munakata等在对卵巢癌组织Fas表 达的研究中发现,Fas在卵巢癌组织中低表达,而在 正常卵巢组织中高表达。本研究表明Fas在胃癌肿 瘤组织中的表达率低于正常组织,且表达强度与胃 癌的组织学分化程度、浸润深度、TNM分期、淋巴结 转移有关。 上述结果表明,Cx43和Fas表达与胃癌的发生 发展有一定的相关性,胃癌组织中Cx43和Fas表达 山东医药2011年第51卷第44期 水平的检测有助于判断胃癌恶性程度。 参考文献: [1]Liang QL,Wang BR,Chen GQ,et 1a.Clinical significance of VaS・ cular endothelial growth factor and connexin43 for predicting pancre- [5]Miekus K,Czernik M,Sroka J,et a1.Contact stimulation of pros— tate cancer cell migration:the role of gap junctional coupling and migration stimulated by hetemtypic cell・・to・-cell contacts in deterrni-- nation of the metastatic phenotype of Dunning rat prostate cancer atic cancer elinicopathologic parameters[J].Med Oncol,2010,27 (4):1164-1170. cells[J].Biol Cell,2005,97(12):893-903. [6]PIl P,Xia z,Yu S,et 1a.Altered expression of Cx43 in astrocytic tumors[j].Clin Neurol Neumsurg,2004,107(1):49_54. [7]Boroumand—NorIh ̄gbi S,Sima HR,Ghafarzadehgan K,et a1.Soln- ble Fas might serve 85 a diagnostic tool for gastric adenocarcinoma [2]Jinn Y,Inase N.Connexin 43,E—cadherin,beta-catenin and ZO・1 expression,and aberrant methylation of the connexin 43 gene in NSCLC[J].Anticaneer Res,2010,30(6):2271-2278. [3]Liang QL,Li ZY,Chen GQ,et 1a.Prognostic value of sel31m solu・ ble Fas in patients with locally advanced unresectable rectl cancer a[J].BMC Cancer,2010,10:275. [8]Das H,Koizumi T,Sugimoto T,et a1.Quantitation of Fas and Fas ligand gene expression in human ovarian,cervical and endometrial receiving concurrent chemoradiotherapy[J].J Zhejiang Univ Sci B,2010,11(12):912-917. carcinomas using real—time quantitative RT-PCR[J].Br J Cancer, 2000,82(10):1682—1688. [4]Herrem-Gonzalez S,Gangoso E,Ginme C,eta a1.Connexin43 in— hibits the oncogenic activity of c—Src in C6 glioma cells[J].Onco— gene,2010,29(42):5712-5723. (收稿日期:2011-04-06) 原发性肝细胞癌患者组织中瘦素及其受体 表达与临床病理特征的关系 蔡俊。王宏升 (北华大学附属医院,吉林吉林132011) 摘要:目的检测瘦素(1eptin)和瘦素受体(OB.R)在原发性肝细胞癌(HCC)患者癌及癌旁组织中mRNA和蛋 自水平表达情况。方法应用RT-PCR和Western blot方法检测leptin其受体在33例HCC患者癌及癌旁组织中 leptin及 mRNA和蛋白表达,并分析其与临床病理特征之间的关系。结果leptin和OB—R mRNA及蛋白在癌旁组织表达水 平高于癌组织(P<0.05)。leptin和OB—R的表达与各临床病理特征均无显著相关(P>0.05)。结论OB-R在HCC患者的癌及癌旁组织中均表达。 关键词:瘦素;瘦素受体;原发性肝细胞癌 中图分类号:R735.7 文献标志码:B 文章编号:1002-266X(2011)44-0085-02 近年研究发现,瘦素(1eptin)及其特异性瘦素受 cm),再切取癌组织。将取下的标本迅速切成0.3 cm×0.3 cm×0.3 cm大小装入冻存管中,经液氮速 冻后保存于液氮罐中。标本均经病理证实,并记录 体(OB—R)在多种肿瘤中均有异常表达,提示其表达 可能与肿瘤的发生、发展关系密切 l2 J。关于leptin 及其受体在原发性肝细胞癌(HCC)中表达情况的 研究不多,并且结果报道不一【3-6j。2010年11月 ~临床资料,包括年龄、性别、HBV感染、血清AFP水 平、肿瘤大小、TNM分期等。其中男30例、女3例, 年龄22~70(48.5±12.9)岁。 1.2方法 2011年4月,我们通过RT—PCR和Westem blot方 法检测HCC及癌旁组织中leptin及OB.R mRNA和 蛋白的表达,并分析其与临床病理特征之间的关系, 旨在为进一步研究leptin及其受体与HCC的关系 奠定基础。 1.2.1 RT—PCR检测mRNA表达取肝癌及癌旁 组织30 mg,用RNeasy Mini kit(Qiagen,Valencia, CA)提取组织总RNA并用紫外分光光度计方法定 量,用High Capacity RNA・to—cDNA Kit进行cDNA合 成(Applied Biosystems,USA)。取cDNA 200 ng,用 1材料与方法 1.1材料HCC标本33例,癌组织及癌旁组织标 本均取自术中,先切取癌旁组织(距肿瘤边缘5 AmpliTaq Gold DNA聚合酶(Applied Biosystems,