第１９卷Ｖ０１．１９ 第４期 Ｎｏ．４ 中莲药导般 Ｇｕｉｄｉｎｇ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｙ ２０１３年４月 Ａｐｒｉｌ．２０１３ 补肾温肺合剂 挥发油提取工艺研究术 王大海 ，冯传平：（通讯作者），狄庆锋ｚ，杨惠ｚ （１．湖南中医药高等专科学校附属第一医院。湖南株洲４１２０００ ２．湖南中医药高等专科学校，湖南株洲４１２０１２） 『摘要１ 目的：优选补肾温肺合剂中提取挥发油的最佳工艺方法。方法：采用水蒸气蒸馏法、水蒸气蒸馏法（改良法）、溶 剂提取法、超声波提取法提取补肾温肺合剂中的挥发油，比较其提取量，并采用气相法ｆＧｃ）对化学成分峰进行比较。结果：４种 方法的提取油量和提取率分别是２－３、２．４８、１．７、１．４ ｍＬ和１．５３％、１．６６％、１．１３％、０．９３％；ＧＣ图也证明改进后的水蒸汽蒸馏法挥 发油组分种类明显比溶剂提取法、超声波提取法多。结论：采用改进后的水蒸汽蒸馏法提取挥发油在提取油量和挥发油组分 种类方面优于溶剂提取法、超声波提取法。 『关键词］ 中药合剂；挥发油；提取工艺；ＧＣ 『中图分类号１ Ｒ２８４．２『文献标识码１ Ａ『文章编号１ １６７２—９５１Ｘ（２０１３）０４—００７２—０２ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ Ｖｏｌａｔｉｌｅ Ｏｉｌ ｆｒｏｍ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｉｎｇ－－Ｋｉｄｎｅｙ Ｗａｒｍｉｎｇ－－ Ｌｕｎｇ Ｍｉｘｔｕｒｅ ＷＡＮＧ Ｄａ—ｈａｉｔ，ＦＥＮＧ Ｃｈｕａｎ—ｐｉｎ （Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ Ａｕｔｈｏｒ），ＤＩ Ｑｉｎｇ－ｆｅｎｆ，ＹＡＮＧ Ｈｕｉ２ ｒＪ．Ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｈｕｎａｎ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｂｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｚｈｕｚｈｏｕ ４１２０００，Ｃｈｉｎａ； ２．Ｈｕｎａｎ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｚｈｕｚｈｏｕ ４１２０１２，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｏｉｌ ｉｎ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｉｎｇ—Ｋｉｄｎｅｙ Ｗａｒｍｉｎｇ－Ｌｕｎｇ Ｍｉｘ— ｔｕｒｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｏｉｌｓ ｗｅｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｉｎｇ－Ｋｉｄｎｅｙ Ｗａｒｍｉｎｇ－Ｌｕｎｇ Ｍｉｘｔｕｒｅ ｂｙ ｓｔｅａｍ ｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ，Ｓｏｌ－ ｖｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｏｉ１ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ＧＣ． Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｑｕａｎｔｉｔｙ ｏｆ ０ｉｌ ０ｆ ｆｏｕｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｅｒｅ ２．３．２．４８．１．７ ａｎｄ １．４ ｍＬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ １．５３％．１．６６％．１．１３％ａｎｄ ０．９３％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＧＣ ｓｈｏｗｓ ｔｈａｔ ｔｈｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｏｉｌ ｂｙ ｓｔｅａｍ ｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ ｉＳ ｂｅｔｔｅｒ ｔｈａｎ ｏｔｈｅｒ ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｓｔｅａｍ ｄｉｓｔｉｌｌａｔｉｏｎ ｉＳ ｂｅｔｔｅｒ ｔｈａｎ ｏｔｈｅｒ ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｏｉｌ ａｎｄ ｔｈｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｏｉｌ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｉｎｇ—Ｋｉｄｎｅｙ Ｗａｒｍｉｎｇ—Ｌｕｎｇ Ｍｉｘｔｕｒｅ；Ｖｏｌａｔｉｌｅ Ｏｉｌ；Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ Ｐｒｏｃｅｓｓ；ＧＣ 补肾温肺合剂是我校附属医院的临床有效方，获得了院 １材 料 内制剂批文ｆ株卫药剂字（９８）０３第０３４号１，由淫羊藿、黄芪、防 风、白术等１０味中药组成。主要用于过敏性鼻炎，支气管哮喘 以及由Ｉ型变态反应引起的湿疹，异位性皮炎，荨麻疹等疾病， 同时能提高人体免疫能力，预防感冒Ｉ１－３１。方中白术、防风、细 辛等药材富含挥发油成分，经现代药理研究证明具有一定的 １．１ 药品与试剂 白术、防风、细辛等药材均购于湖南 湘 中药饮片有限公司，经我校生药教研室彭学著副教授鉴定。 １．２仪器ＨＰ５８９０型气相色谱（ＧＣ）仪（日本岛津公司）；药 典挥发油提取器及９８～１一Ｂ型电子调温电热套（天津市泰斯特 仪器有限公司）。 ２方 法 药理活性 。为了筛选提取挥发油的最佳工艺方法，为剂型设 计提供依据，本文通过考察水蒸汽蒸馏法、溶剂提取法、超声 ２．１水蒸汽蒸馏法分别称取白术、防风、细辛各５０ ｇ，适当 波提取法提取挥发油的组分种类和提取量。同时又由于挥发 油在热水中有一定的溶解度，依照现行的水蒸气蒸馏法提取 挥发油会有一定损失，为了较完全地提取挥发油，本实验采 粉碎，ＪＪｎ８倍量水，即１２００ ｍＬ，用挥发油提取器提取，分别于 １、２、４、６、８、１２、１６、２０ｈ，读取挥发油提取量，直至挥发油体积 基本不变，记录累积提取量，收集所提挥发油，将该挥发油用 乙醚稀释并用无水硫酸钠干燥，过滤，回收乙醚，得挥发油Ａ 用了改进的水蒸汽蒸馏法提取Ｉ５１，即用水蒸气蒸馏法提取挥 发油后，继续收集蒸馏液，用乙酸乙酯萃取蒸馏液中的挥发 油，减少了挥发油成分的损失。进一步证明了采用水蒸汽蒸 备用；上述芳香水继续加热，收集蒸馏液，将收集到的蒸馏液 用乙酸乙酯萃取３次，合并乙酸乙酯液并用无水硫酸钠干燥，过 滤，回收乙酸乙酯，又得挥发油Ｂ。将挥发油Ａ和挥发油Ｂ合并， 就得改进的水蒸汽蒸馏法所提得的提发油总量。 馏法提取挥发油后制备成液体剂型的可行性。 基金项目：湖南省中医药科研计划项目（２０１０１１７） ７２ 第１９卷 第４期 Ｖｏ１．１９ Ｎｏ．４ 中莲为导般 Ｇｕｉｄｉｎｇ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｙ ２０１３年４月 Ａｐｒｉｌ．２０１３ ２．２溶剂提取法分别称取白术、防风、细辛各５０ ｇ，适当粉 碎，加８倍量９５％乙醇，即１２００ｍＬ，回流２次，每次２ｈ，滤过，药 渣压榨，合并滤液，回收至无醇味，溶液用乙酸乙酯萃取３次， 合并乙酸乙酯液并用无水硫酸钠干燥，过滤，回收乙酸乙酯， 得挥发油ｃ样品。 ＴｈⅢ ２＿３超声波提取法分别称取白术、防风、细辛各５０ ｇ，适当 ＲＴ 图３溶剂提取法提取的挥发油ＧＣ图 ∞ ’●５ｊ Ｓ¨ ０ 粉碎，加８倍量９５％乙醇，即１２００ ｍＬ，超声波４５℃提取２次，每 次３０ ｍｉｎ，滤过，药渣压榨，合并滤液，回收至无醇味，溶液用 乙酸乙酯萃取３次，合并乙酸乙酯液并用无水硫酸钠干燥，过 滤，回收乙酸乙酯，得挥发油Ｄ样品。 ２．４测试条件ＧＣ条件：色谱柱为ＳＥ一５４石英毛细管柱（２５ ｍ× ０．２２ ｍｍｘＯ．３３ Ｉ．ｚｍ），色谱条件：程序升温，５０℃，以１０￣Ｃ／ｍｉｎ升 至２２０ ｏＣ；５０ ｏＣ时保留１ ｍｉｎ，１００ ｏＣ停留３ ｍｉｎ，１５０℃停留 ３ ｍｉｎ，２００ ｏＣ停留１ ｍｉｎ；柱流量：０．９８ ｍＬ／ｍｉｎ，载气为氦气。 ３结 果 ３．１ 水蒸汽蒸馏法不同时间提取挥发油的量见表１。 表１不同时间提取挥发油的量 ｛ｎ＝３） 时间 １ ｈ ２ ｈ ３ ｈ ４ｈ ６ｈ ８ ｈ １２ ｈ １６ｈ ２０ｈ 挥发油量（ｍＬ） １．５ １．６ １．７ １．８ １．９ ２．０ ２．２ ２．２ ２．３ 由上表可以看出１２ ｈ后挥发油量增加缓慢，２Ｏ ｈ提取挥 发油的量为２．３ ｍＬ，提取率为１．５３％。 ３．２不同方法提取挥发油的量见表２。 表２不同方法提取挥发油的量 《ｎ＝３） 结果显示用改进后的水蒸汽蒸馏法，提取得到的挥发油 量与提取率均高于其它方法。 ３．３不同方法提取挥发油的图谱比较按上述ＧＣ条件对挥 发油Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ样品进行分析鉴定。（见图１－４） ＲＴ Ｏ∞一¨ｅ３ ｏ ｌ１ 一 ．．，，． 图ｌ 经典水蒸汽蒸馏法提取的挥发油ＧＣ图 Ｒｔ。Ｄ∞ ¨ Ｓ¨７Ｇ Ｔ ｅ脚ｍ 图２芳香水蒸馏液萃取的挥发油ＧＣ图 图４超声波提取法提取的挥发油ＧＣ图 结果显示水蒸汽蒸馏法提取的挥发油成分种类明显比 溶剂提取法、超声波提取法多，芳香水蒸馏液萃取的挥发油 ＧＣ图也进一步说明挥发油在热水中有一定的溶解度，且其所 含挥发油组分与经典水蒸汽蒸馏法提取的挥发油有不同之 处，结果说明采用改进后的水蒸汽蒸馏法提取挥发油优于其 它方法。 ４小 结 补肾温肺合剂处方中自术、防风、细辛等药材富含挥发 油成分，现已证明其具有重要的药理活性，因此，必须尽可能 多提取其含挥发油组分，通过考察不同时间提取挥发油的量， 显示水蒸汽蒸馏法提取１２ ｈｔＬ较合适。 本制剂是临床有效方，提取挥发油后的芳香水是合剂的 组成部分，由于挥发油在热水中有一定的溶解度，本实验再 次证明水蒸汽蒸馏法在利用挥发油方面要优于其它方法。 本实验只运用ＧＣ对挥发油的组分种类做比较，未对化学 成分进行结构分析，在以后的研究中需进一步分析。 参考文献 【１】王大海，龚兴宏，符晓，等．补肾温肺合剂治疗过敏性鼻炎的 近期疗效观察［Ｊ］湖南中医学院学报，２００１，２１（３）：４２—４４ ［２］韩绘宇，王大海．补肾温肺胶囊治疗过敏性鼻炎的远期疗 效观察【Ｊ】．中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志，２００２，１０（５）： ２３３－２３４ ［３］王大海，陈建龙，李定祥，等．补肾温肺胶囊调节变应性鼻炎 红细胞免疫复合物受体花环率等的影响 中国中西医结 合耳鼻咽喉科杂志。２００８。１６（２）：８９—９１ ［４］阴健，郭力弓．中药现代研究与临床应用［Ｍ］．北京：学苑出 版社，１９９３：１－２００ ［５］沈国庆，张宏桂．白术挥发油提取方法改进［Ｊ１．中国药房， ２００７，ｌ８（２７），２１１２—２１１４ （收稿日期：２０１２—１２—２０编辑：李海洋） ７３
